使用其他方法登录
0元试用�。。。。。 。。�
扫码或点击链接填写试用申请表
肿瘤细胞转移主要包括以下5个历程：
原位侵袭（Local invasion），，，， ，，
肿瘤细胞内渗（Intravasation），，，， ，，
循环系统存活（Survival in the circulation），，，， ，，
肿瘤细胞外渗（Extravasation），，，， ，，
形成转移灶（Micrometastasis formation）等。。。。。 。。
其中细胞侵袭爆发在第一步，，，， ，，即肿瘤细胞在原位突破基底膜，，，， ，，然后内渗进入血管、淋巴管的历程。。。。。 。。其侵袭性是肿瘤相关信号通路、药物治疗、靶向治疗、致癌/抑癌基因等肿瘤学研究的一个主要指标。。。。。 。。
（肿瘤细胞转移历程，，，， ，，泉源DOI:10.1016/j.cell.2011.09.024）
肿瘤细胞侵袭实验通常使用细胞小室（常用6孔、12孔、24孔板等）举行检测。。。。。 。。
与肿瘤细胞迁徙实验差别的是，，，， ，，需在聚碳酸酯膜上侧铺一层基质胶，，，， ，，用以模拟细胞外基质。。。。。 。。
肿瘤细胞必需渗透基质金属卵白酶（MMPs）消化基质才华进入下室，，，， ，，更好的模拟了动物体内的情形。。。。。 。。
侵袭实验历程
向上滑动阅览
a. 基质胶包被：
(a) 将基质胶置于冰中并在4℃融化，，，， ，，使用预冷的移液管或吸头混淆基质胶至匀称状态。。。。。 。。(b) 在冰上，，，， ，，将基质胶用无血清作育液凭证1:8的比例举行稀释，，，， ，，例如取8?l基质胶加入64?l不含血清的作育液中，，，， ，，使用预冷的吸头混淆至匀称状态。。。。。 。。
注：常用的稀释比例为1:4、1:6、1:8，，，， ，，可凭证实验详细情形调解稀释比例。。。。。 。。(c) 取60?L上述混淆溶液笔直加入细胞小室中，，，， ，，使其匀称平铺在底部。。。。。 。。
(d) 吸出未团结的基质胶。。。。。 。。
(e) 加入100?l不含血清的作育液，，，， ，，将作育板置于37℃作育箱孵育30分钟，，，， ，，举行水化。。。。。 。。(f) 去除小室中液体，，，， ，，检查是否有液体穿过小室进入到下室中，，，， ，，若没有，，，， ，，则可用于接种细胞。。。。。 。。
b. 细胞悬液的制备：(a) 对细胞举行12-24小时的饥饿处置惩罚。。。。。 。。（非必需办法）(b) 消化细胞，，，， ，，用不含血清的作育液重悬，，，， ，，调解细胞密度为5-50万个/mL。。。。。 。。
c. 细胞接种：(a) 取500?L含10% FBS的作育液加入24孔板下室，，，， ，，用镊子将细胞小室置于24孔板内。。。。。 。。
(b) 取200?L细胞悬液加入细胞小室。。。。。 。。(c) 将24孔板置于作育箱中作育24-48小时。。。。。 。。
d. 细胞牢靠、染色：(a) 取出细胞小室，，，， ，，去除作育液，，，， ，，用棉签轻轻擦拭基质胶及细胞。。。。。 。。(b) 在24孔板清洁的孔中加入600?l 4%多聚甲醛牢靠液，，，， ，，将小室放入牢靠20-30分钟。。。。。 。。(c) 弃牢靠液，，，， ，，PBS洗涤小室1次。。。。。 。。
(d) 在24孔板清洁的孔中加入适量结晶紫染色液，，，， ，，将小室放入染色5-10分钟。。。。。 。。(e) 取出小室，，，， ，，PBS洗涤3次。。。。。 。。
(f) 适当风干后，，，， ，，显微镜下视察并计数。。。。。 。。
除细胞侵袭实验外，，，， ，，基质胶可被用于类器官作育、干细胞分解、血管天生、体内肿瘤爆发等多项研究。。。。。 。。
