01贴壁细胞作育，，，，，，，细胞不贴壁
可能缘故原由：胰卵白酶消化太过 ；；；；；；；；支原体污染 ；；；；；；；；作育基pH值过碱（NaHCO3剖析） ；；；；；；；；细胞老化 ；；；；；；；；接种细胞起始浓度太低或太高。。。 。。。
解决要领：缩短胰卵白酶消化时间或降低胰卵白酶浓度 ；；；；；；；；疏散作育物，，，，，，，检测支原体。。。 。。。清洁支架或作育箱。。。 。。。如发明支原体污染，，，，，，，扬弃作育物 ；；；；；；；；使用无菌醋酸溶液调解pH值或充入无菌CO2 ；；；；；；；；启用新的保种细胞 ；；；；；；；；调理最佳接种细胞浓度。。。 。。。
02悬浮细胞成簇
可能缘故原由：作育液中含钙,镁离子 ；；；；；；；；支原体污染 ；；；；；；；；卵白酶太过消化使得细胞裂解 ；；；；；；；；DNA污染。。。 。。。
解决要领：用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞，，，，，，，轻盈吹吸细胞获得单细胞悬液 ；；；；；；；；疏散作育物，，，，，，，检测支原体 ；；；；；；；；DNasel处置惩罚细胞。。。 。。。
03作育细胞生长缓慢
可能缘故原由：由于替换差别作育液或血清 ；；；；；；；；作育液中一些细胞生长必需因素如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破损 ；；；；；；；；作育物中有少量细菌或真菌污染 ；；；；；；；；试剂生涯不当 ；；；；；；；；接种细胞起始浓度太低 ；；；；；；；；细胞已老化 ；；；；；；；；支原体污染。。。 。。。
解决要领：较量新作育液与原作育液因素，，，，，，，较量新血清与旧血清支持细胞生长实验，，，，，，，让细胞逐渐顺应新作育液 ；；；；；；；；换入新鲜设置作育液，，，，，，，或补加谷氨酰胺及生长因子 ；；；；；；；；用无抗生素作育液作育，，，，，，，如发明污染，，，，，，，扬弃作育物 ；；；；；；；；血清需生涯在-10到-20℃。。。 。。。作育液需在2-8℃避光生涯。。。 。。。含血清完全作育液在2-8℃生涯，，，，，，，需在1周内用完 ；；；；；；；；增添接种细胞起始浓度 ；；；；；；；；换用新的保种细胞 ；；；；；；；；疏散作育物，，，，，，，检测支原体。。。 。。。清洁支架和作育箱。。。 。。。如发明支原体污染，，，，，，，扬弃作育物。。。 。。。
04作育细胞生长欠好
可能缘故原由：
? 细胞自己的状态
细胞传代次数多，，，，，，，细胞老化 ；；；；；；；；
细胞的接种量：接种量过低，，，，，，，细胞生长缓慢 ；；；；；；；；
细胞传代时间过晚：细胞中毒，，，，，，，影响传代后的细胞生长 ；；；；；；；；
胰酶消化时间过长或过短：时间过长，，，，，，，细胞殒命 ；；；；；；；；时间过短，，，，，，，细胞未完全疏散而成团，，，，，，，细胞殒命 ；；；；；；；；
细胞的冻存与苏醒：慢冻速溶。。。 。。。
? 污染
支原体污染 ；；；；；；；；
霉菌污染。。。 。。。
? 作育基或血清
替换血清或作育基之前未举行验证 ；；；；；；；；
选择的作育基是否合适 ；；；；；；；；
作育基配制是否合适 ；；；；；；；；
作育基配制是否准确无误。。。 。。。
? 作育情形
CO2供应是否正常 ；；；；；；；；
作育箱或摇床温度控制是否准确。。。 。。。
解决要领：凭证以上四个方面的可能缘故原由，，，，，，，做出针对性的解决计划
? 注重细胞的自己状态：如传代次数，，，，，，，接种量等：
? 阻止爆发污染（用正规，，，，，，，正当，，，，，，，可朔源的血清） ；；；；；；；；
? 要用合适的血清或作育基，，，，，，，最好经由验证 ；；；；；；；；
? 注重实验室的情形。。。 。。。
05作育细胞殒命
可能缘故原由：作育箱内无CO2 ；；；；；；；；作育箱内温度波动太大 ；；；；；；；；细胞冻存或苏醒历程中损伤 ；；；；；；；；作育液渗透压不准确 ；；；；；；；；作育液中有毒代谢产品群集。。。 。。。
解决要领：检测作育箱内CO2 ；；；；；；；；检查作育箱内温度 ；；；；；；；；取新的生涯细胞种 ；；；；；；；；检测作育液渗透压 ；；；；；；；；换入新鲜作育液。。。 。。。
